期刊简介
《国际检验医学杂志》创刊于1980年，原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》，（ISSN 1673-4130 CN 50-1176/R），现由重庆市卫生局主管，重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊，邮发代号国内78－26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。
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首页>国际检验医学杂志
- 杂志名称：国际检验医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生局
- 主办单位：重庆市卫生信息中心
- 国际刊号：1673-4130
- 国内刊号：50-1176/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2a转肽酶区的克隆、表达及纯化鉴定
马洪玉；兰小鹏；陈敏
关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌, mecA基因, 青霉素结合蛋白2a, 转肽酶区
摘要：目的：构建编码耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）青霉素结合蛋白2a （PBP2a）转肽酶区基因片段的原核表达载体，并表达、纯化及鉴定蛋白。方法从临床标本中分离鉴定M RSA ，设计针对编码 PBP2a转肽酶区基因片段的引物，采用聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因片段，克隆至pET28a（＋）载体，双酶切鉴定并测序，转化大肠杆菌BL21（DE3）plysS株；用0．7 mmol／L异丙基硫代‐β‐D‐半乳糖苷（IPTG）诱导表达后，利用Ni亲和层析技术纯化目的蛋白；蛋白免疫印迹法（WB）鉴定重组蛋白。结果重组表达载体经BamHⅠ、EcoRⅠ酶切，产物在预期大小处出现条带，测序结果显示有两个碱基突变，无移码突变。所表达的PBP2a蛋白经十二烷基硫酸钠‐聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS‐PAGE）和WB鉴定，在相对分子质量38×103处可见一新生蛋白条带。结论成功构建了PBP2a转肽酶区原核表达载体，并获得了高效表达，制备了高纯度的目的蛋白。
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