期刊简介

               《国际检验医学杂志》创刊于1980年,原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》,(ISSN 1673-4130  CN 50-1176/R),现由重庆市卫生局主管,重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊,邮发代号国内78-26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。                

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  • 杂志名称:国际检验医学杂志
  • 主管单位:重庆市卫生局
  • 主办单位:重庆市卫生信息中心
  • 国际刊号:1673-4130
  • 国内刊号:50-1176/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
国际检验医学杂志2015年第01期

抗 AEG-1单链可变区抗体的原核表达及纯化

路蔓;刘昕阳;龙敏;王琛;刘冲;郜赵伟;欧阳永日;陈曦;张惠中

关键词:星形细胞上调基因 1, 单链可变区抗体, 原核表达
摘要:目的:构建抗星形细胞上调基因1(AEG-1)单链可变区抗体(V23)的原核表达载体,并对表达蛋白进行纯化及免疫活性检测。方法应用 Primer5软件设计针对抗 AEG-1单链可变区抗体基因序列的引物,构建 PRsetC/V23原核表达质粒,经限制性内切酶 Pst1酶切以及 DNA 测序鉴定正确后,将原核表达质粒导入大肠杆菌 BL21中,构建含 V23基因的原核表达工程茵。经 IPTG 诱导后,用带 His 标签的磁珠纯化目的蛋白,SDS-PAGE 电泳检测目的蛋白含量,Western blot 及 ELISA 检测抗 AEG-1单链可变区抗体的免疫活性。结果构建的原核表达质粒 PRsetC/V23经单酶切和测序分析显示,构建的 V23基因与设计序列100%一致。IPTG 诱导后,SDS-PAGE 电泳显示在31×103处出现一条明显蛋白条带,Western blot 检测在80×103处出现AEG-1特异反应条带,ELISA 检测显示阳性结果。结论成功构建了 PRsetC/V23原核表达质粒及 V23原核表达工程茵,该工程茵可表达抗 AEG-1单链可变区抗体蛋白,且该蛋白具有良好的免疫活性。