期刊简介
《国际检验医学杂志》创刊于1980年,原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》,(ISSN 1673-4130 CN 50-1176/R),现由重庆市卫生局主管,重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊,邮发代号国内78-26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。
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- 杂志名称:国际检验医学杂志
- 主管单位:重庆市卫生局
- 主办单位:重庆市卫生信息中心
- 国际刊号:1673-4130
- 国内刊号:50-1176/R
- 出版周期:半月刊
期刊荣誉:2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
应用siRNA技术抑制产肠毒素大肠杆菌LT 基因表达的研究
付瑞;刘华;段勇;王玉明;单斌
关键词:产肠毒素大肠杆菌, 不耐热肠毒素, 小干扰RNA技术, RNA干扰
摘要:目的:应用小干扰RNA(siRNA)技术抑制产肠毒素大肠杆菌(ETEC)LT 基因的表达。方法针对 LT基因设计siRNAs序列,在ETEC培养过程中,将针对LT的siRNA、非特异性对照siRNA、阴性对照siRNA和LB培养基分别加入siRNA组(siRNA‐LT1组、siRNA‐LT2组)、siRNA‐coa3组、siRNA‐NC组和空白对照组,分3个时间点加入,每次1 nmol。在首次加入siRNA后45 min(A时间点)、90 min(B时间点)、135 min(C时间点)留取菌液,应用实时荧光定量PCR检测上述3个时间点5组LT mRNA的表达水平。应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测siRNA‐LT1组、siRNA‐LT2组和空白对照组在3个时间点的LT蛋白表达水平。结果实时荧光定量PCR结果显示,siRNA‐LT1在A、B、C 3个时间点对LT mRNA表达的抑制率分别为70.9%、70.1%、72.5%,siRNA‐LT2在A、B、C 3个时间点对LT mRNA表达的抑制率分别为70.1%、69.2%、70.5%,siRNA‐LT1组、siRNA‐LT2组对LT mRNA表达的抑制率与相应处理时间的siRNA‐NC组、siRNA‐coa3组、空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果显示,siRNA‐LT1和siRNA‐LT2在A、B、C 3个时间点对LT蛋白表达的抑制率分别为43.1%、18.4%、5.0%和38.2%、15.4%、30.1%。结论针对L T基因设计合成的siRN A在体外能有效地抑制L T 基因的表达。
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