期刊简介
《国际检验医学杂志》创刊于1980年，原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》，（ISSN 1673-4130 CN 50-1176/R），现由重庆市卫生局主管，重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊，邮发代号国内78－26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。
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- 杂志名称：国际检验医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生局
- 主办单位：重庆市卫生信息中心
- 国际刊号：1673-4130
- 国内刊号：50-1176/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
华支睾吸虫表膜蛋白TP31．8的克隆、表达及免疫活性
姚淑雯；胡旭初；徐劲；余新炳；周珍文
关键词：华支睾吸虫, 重组蛋白质类, 克隆, 生物
摘要：目的：从华支睾吸虫cDNA文库扩增表膜蛋白31．8 kDa（TP31．8）基因，克隆入表达载体pGEX-4T-1，诱导表达重组蛋白，纯化重组蛋白免疫大鼠获得特异性抗体，为后续功能研究奠定基础。方法以华支睾吸虫cDNA文库为模板，设计一对特异性引物，扩增华支睾吸虫TP31．8基因，扩增产物经犈犮狅犚Ⅰ、犡犺狅Ⅰ双酶切后与做相应酶切的pGEX-4T-1连接，转化大肠杆菌BL21，提取质粒进行双酶切鉴定，IPTG诱导重组蛋白表达，并对基因进行测序及比对分析。融合蛋白经谷胱甘肽 Sepharose 4B柱纯化后，用凝血酶去除谷脱甘肽疏基转移酶（GST ）。获得纯化的重组蛋白，使用重组蛋白皮下注射免疫大鼠，ELISA 检测抗TP31．8的特异性IgG抗体滴度。结果 TP31．8基因成功扩增，重组 pGEX-4T-1-TP31．8双酶切鉴定可见目的片段。测序结果显示TP31．8在正确阅读框中，TP31．8开放阅读框长828 bp，编码相对分子质量为31．8×103的蛋白，等电点为4．7。TP31．8与其他蠕虫的表膜蛋白具同源性，与日本血吸虫表膜蛋白Sm20的一致性为41％，IPTG 诱导后，pGEX-4T-1-TP31．8/BL21有相对分子质量57．8×103融合蛋白的表达。融合蛋白经凝血酶酶切后得到相对分子质量31．8×103的重组蛋白。使用重组蛋白免疫大鼠，ELISA检测抗重组蛋白的特异的IgG抗体滴度为1∶25600。结论成功克隆了华支睾吸虫表膜蛋白TP31．8基因，并获得重组蛋白的表达。重组TP31．8具免疫原性，免疫大鼠获得的特异性抗体滴度为1∶25600，为其后续功能研究奠定了基础。
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