期刊简介
《国际检验医学杂志》创刊于1980年,原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》,(ISSN 1673-4130 CN 50-1176/R),现由重庆市卫生局主管,重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊,邮发代号国内78-26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。
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- 杂志名称:国际检验医学杂志
- 主管单位:重庆市卫生局
- 主办单位:重庆市卫生信息中心
- 国际刊号:1673-4130
- 国内刊号:50-1176/R
- 出版周期:半月刊
期刊荣誉:2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
人胱硫醚β合酶I278T突变体的表达、纯化及鉴定
牛卫宁;许乐;羊梦林;曹珊珊
关键词:胱硫醚β合酶, 突变, 粒径, Zeta电位
摘要:探讨在大肠埃希菌中重组表达和纯化人胱硫醚β合酶CBS(I278T )突变体。方法采用重叠延伸聚合酶链反应(PCR)定点突变技术构建突变质粒pGEX4T-1-CBS(I278T ),在含有3%乙醇的培养基中诱导表达,亲和层析纯化得到突变CBS (I278T)蛋白,测定纯化蛋白的活性、紫外可见吸收光谱、蛋白粒径及Zeta电位。结果成功构建了质粒pGEX4T-1-CBS(I278T)。CBS(I278T )蛋白产率、比活性及酶活性回收率分别为2.3 mg/L、21.4 U/mg、22.6%。终浓度为1 mmol/L的 S-腺苷甲硫氨酸(AdoMet)对突变CBS(I278T)蛋白没有激活作用。紫外可见吸收光谱分析显示纯化的突变CBS(I278T)存在429 nm和550 nm的血红素结合蛋白特征吸收峰。蛋白平均粒径为7.5~10.1 nm ,主要以四聚体形式存在,Zeta电位为-16.3 mV。结论成功建立了在大肠埃希菌中表达、纯化及鉴定突变CBS(I278T )的方法。
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