期刊简介
《国际检验医学杂志》创刊于1980年，原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》，（ISSN 1673-4130 CN 50-1176/R），现由重庆市卫生局主管，重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊，邮发代号国内78－26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。
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- 杂志名称：国际检验医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生局
- 主办单位：重庆市卫生信息中心
- 国际刊号：1673-4130
- 国内刊号：50-1176/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
S-同型半胱氨酸甲基转移酶活性检测和保存方法的建立
刘培；周建平；许秀丽；郝庆钦；温新宇；王玲；田亚平
关键词：S-同型半胱氨酸甲基转移酶, 亲和层析法, 活性测定, 稳定性
摘要：目的：建立一种简单的S-同型半胱氨酸甲基转移酶（H MT）活性测定方法，确定 H MT的佳使用条件，并初步探索HMT的保存方法。方法采用原核表达系统制备 HMT，经镍亲和层析和Sephadex G15两步纯化。SDS-PAGE 对目的蛋白进行理化性质鉴定。基于5，5′-二硫基-双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）可以特异性地与含有巯基的化合物快速发生化学反应的原理，通过检测同型半胱氨酸的减少量来计算酶活性，确定 HMT佳活性测定条件。比较添加和不添加甘油的两组 HMT 酶液置于不同温度下保存，定期测定活力；在 HMT酶液中加入不同浓度的不同保护剂，比较冷冻干燥后的活性保留率。结果重组表达的酶纯度高达95％以上，相对分子质量为36000，具有良好的催化活性，比活为2000 U/mg。在37℃、pH7．4的HEPES缓冲液中反应25 min为酶活性测定佳条件。加入甘油能明显延长酶的保存时间并且酶液在6个月内的活力保留一半。冷冻保护剂甘露醇和海藻糖的添加对 HMT酶冻干品的酶活保留率分别为104．0％和100．0％。结论通过基因工程技术获得 HMT，建立了简单的 HMT活性测定方法，并确定了该酶的佳保存方法，为临床应用奠定了基础。
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