期刊简介
《国际检验医学杂志》创刊于1980年，原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》，（ISSN 1673-4130 CN 50-1176/R），现由重庆市卫生局主管，重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊，邮发代号国内78－26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。
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首页>国际检验医学杂志
- 杂志名称：国际检验医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生局
- 主办单位：重庆市卫生信息中心
- 国际刊号：1673-4130
- 国内刊号：50-1176/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
肠道病毒71型 VP1基因的扩增、克隆、表达及蛋白分析
刘云锋；周珍文；关锐梨；关启鸿；骆鸣勇；周帅
关键词：肠道病毒 71 型, 酶联免疫吸附测定, 基因
摘要：目的：对肠道病毒71型 VP1基因片段进行扩增、克隆、生物信息学分析、原核表达、纯化，初步证实重组表达产物的生物学活性。方法根据 GenBank 中 EV71序列设计一对特异性引物，以 EV71患者咽拭子标本中提取病毒核糖核酸为模板， RT-PCR 扩增 EV71 VP1基因，酶切后插入表达载体 pET28a。构建 pET28a-EV71 VP1原核表达载体。转化 E．coli DH5α，IPTG诱导表达，使用 SDS-PAGE 及 Western blot 分析表达结果，利用软件对测序结果进行生物信息学分析。纯化蛋白并包被反应板，用 ELISA 分别检测 EV71阳性与 COX A16阳性患者 VP-1 IgG 抗体，进行统计学分析。结果目的基因经 BLAST 比对，同源性与 GenBank 登录号为 JQ766207．1 EV71 VP1一致性达99％。EV71 VP1蛋白相对分子质量约为32×103，主要以包涵体形式存在。生物信息学分析得出，EV71 VP1蛋白为亲水性蛋白，无跨膜区，不具有 N-端信号肽序列，存在三级结构。ELISA 结果显示EV71阳性患者 OD 值为（2．425±0．521），COX A16阳性患者 OD 值为（1．205±0．314），健康对照组 OD 值为（0．353±0．128）。EV71 VP1蛋白检测敏感性和特异性分别为84％和88％。结论成功构建了 pET28a-EV71 VP1表达载体；通过对手足口患者血清进行 ELISA 初步分析，得出目的蛋白有较高的敏感性和特异性，初步证实具有生物学活性，可进一步用于 EV71诊断及疫苗的相关研究。
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