期刊简介
《国际检验医学杂志》创刊于1980年，原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》，（ISSN 1673-4130 CN 50-1176/R），现由重庆市卫生局主管，重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊，邮发代号国内78－26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。
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首页>国际检验医学杂志
- 杂志名称：国际检验医学杂志
- 主管单位：重庆市卫生局
- 主办单位：重庆市卫生信息中心
- 国际刊号：1673-4130
- 国内刊号：50-1176/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体对SGC-7901细胞增殖的影响
陈建国；韩跃武
关键词：反义 RNA, 细胞增殖, 重组载体
摘要：目的：构建 BAG-1、Bcl-2双靶区反义 RNA 重组载体 pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2及单表达重组载体 pVITRO2-As-BAG-1和 pVITRO2-AsBcl-2，并初步研究它们对人胃癌细胞株 SGC-7901增殖活性的影响，为进一步探讨该重组载体对肿瘤细胞的影响打下基础。方法从胃癌细胞株 SGC-7901总 RNA 中逆转录扩增包括全部编码序列的 BAG-1和 Bcl-2 cDNA，TA 克隆到pMD18-T Simple 载体，分别经 BamHⅠ和 ClaⅠ、EcoRⅠ和 NheⅠ双酶切并回收纯化目的片段后，反向插入真核细胞双表达载体pVITRO2的 mcs1和 mcs2中，经酶切、测序鉴定，确定已建立单表达重组载体 pVITRO2-AsBAG-1和 pVITRO2-AsBcl-2，再将Bcl-2反向插入单表达重组载体 pVITRO2-AsBAG-1的 mcs2中，构建双表达重组载体 pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2，酶切、测序鉴定。然后分别转染 SGC-7901细胞，MTT 法检测细胞的增殖活性，半定量 RT-PCR 检测基因 BAG-1 mRNA 和 Bcl-2 mRNA 的表达，流式细胞术检测 SGC-7901的细胞周期变化情况。结果酶切、测序鉴定表明，单表达重组载体 pVITRO2-AsBAG-1和pVITRO2-AsBcl-2及共表达重组载体 pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2构建成功。与对照组比较，MTT 法检测显示重组载体抑制SGC-7901细胞增殖，并呈时间依赖性，其中以72 h 转染组抑制作用显著（P ＜0.01）；RT-PCR 结果显示 BAG-1 mRNA 和 Bcl-2 mRNA 表达水平明显下降（P ＜0.01），而且共表达载体组比单表达载体组更为显著（P ＜0.05），但 pVITRO2-AsBcl-2组对 BAG-1 mRNA 表达水平无明显影响（P ＞0.05）；流式细胞术检测重组载体组凋亡细胞比例升高，与 pVITRO2组和对照组比较均有统计学意义（P ＜0.01），并且共表达重组载体组的效应比单表达重组载体组更为显著（P ＜0.01），凋亡率由对照组的0.57％增加至15.75％。结论成功构建双靶区反义 RNA 重组载体 pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2及单表达重组载体 pVITRO2-AsBAG-1和pVITRO2-AsBcl-2，并发现其能抑制 SGC-7901细胞增殖并引起细胞凋亡，且以 pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2重组载体为明显。
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