期刊简介
《国际检验医学杂志》创刊于1980年,原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》,(ISSN 1673-4130 CN 50-1176/R),现由重庆市卫生局主管,重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊,邮发代号国内78-26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。
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- 杂志名称:国际检验医学杂志
- 主管单位:重庆市卫生局
- 主办单位:重庆市卫生信息中心
- 国际刊号:1673-4130
- 国内刊号:50-1176/R
- 出版周期:半月刊
期刊荣誉:2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA实时荧光定量检测方法的建立及初步应用
卢培;陆慧琦;韩焕兴;朱学源;黄秋芳;龚炜
关键词:血管内皮生长因子C, 血管内皮生长因子受体3, 食管肿瘤, 淋巴结, 肿瘤转移, 荧光, 逆转录作用, 聚合酶链反应
摘要:目的 建立检测血管内皮生长因子-C(VEGF-C)mRNA和血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)mRNA的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法,并在食管癌组织中作初步应用.方法 采用TaqMan荧光探针技术,分别以pMD18-VEGF-C和pMD18-VEGFR-3质粒作为定量模板,应用循环阈值(Ct)定量起始模板,建立检测食管癌组织的VEGF-C mRNA和VEG-FR-3 mRNA的实时FQ-RT-PCR方法.结果 所建方法的线性范围:VEGF-C mRNA和VEGFR-3mRNA均为103~108拷贝/μg总RNA;测定VEGF-C mRNA低值的批内、批间变异系数(CV)分别为7.07%和9.04%,测定VDGF-C mRNA高值的批内、批间CV分别为7.55%和10.28%;测定VEGFR-3 mRNA低值的批内、批间CV分别为7.69%和12.49%,测定VEGFR-3 mRNA高值的批内、批间CV分别为7.31%和9.17%.24例淋巴结转移食管癌患者癌组织VEGF-C mRNA和VEG-FR-3 mRNA的测定范围分别为3.69×106~9.44×106拷贝/μg总RNA和2.54×104~8.03×106拷贝/μg总RNA,均值分别为2.18×106拷贝/μg总RNA和2.27 × 106拷贝/μg总RNA.16例无淋巴结转移食管癌患者癌组织VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的测定范围分别为2.32×103~5.85×105拷贝/μg总RNA和7.31×102~8.21×104拷贝/μg总RNA,均值分别为1.08×105拷贝/μg总RNA和1.68×104拷贝/μg总RNA.提示有淋巴结转移的食管癌组织VEGF-C和VEG-FR-3基因表达水平上调.结论 本组建立的检测VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的实时FQ-RT-PCR方法灵敏、准确、稳定、重复性好,可供VEGF-C、VEGFR-3基因表达的临床检测和研究应用.
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