期刊简介

               《国际检验医学杂志》创刊于1980年,原名《国外医学临床生物化学与检验学分册》,(ISSN 1673-4130  CN 50-1176/R),现由重庆市卫生局主管,重庆市卫生信息中心主办。2011年4月起改为半月刊,邮发代号国内78-26、国外M 6575。本刊辟有专家述评、专题、论著、临床检验研究、基础实验研究、硕博论坛、综述、调查报告、检验技术与方法、经验交流、质控与标规、仪器使用与排障、检验试剂评价、医学检验教育、检验科与实验室管理、个案与短篇等栏目。专题的稿件主要为约稿。                

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  • 杂志名称:国际检验医学杂志
  • 主管单位:重庆市卫生局
  • 主办单位:重庆市卫生信息中心
  • 国际刊号:1673-4130
  • 国内刊号:50-1176/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:2005年荣获卫生部首届卫生医药优秀期刊三等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
国际检验医学杂志2008年第11期

SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR检测survivin甲基化状态

付文荣;程正江

关键词:着色剂, 基因, 甲基化, 聚合酶链反应
摘要:目的 建立SYBR Green Ⅰ实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测survivin甲基化的方法.方法 25例胃癌组织标本及与其配对的正常胃组织经甲基化敏感性限制性内切酶HpaⅡ和Msp Ⅰ处理后,再用SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR对survivin外显子1进行检测.实时荧光定量PCR检测survivin基因内含子2,用于监测经限制性酶消化的基因组DNA浓度变化,10倍系列稀释的基因组标准物用于检验实时PCR的敏感度,PCR产物通过凝胶电泳分析证实.结果 经HpaⅡ酶切后,甲基化的目的 基因PCR产物在熔解曲线上有Tm值为(91.5±0.5) ℃的峰,电泳证实为338 bp的条带.所有经酶消化的样本都能扩增出以Tm值(79.5±0.5) ℃为特征的对照基因(survivin基因内含子2),表明基因组DNA未产生严重的非特异性降解.SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR检测甲基化目的 基因的灵敏度为100拷贝/μL.用以上新建的体系检测25例胃癌标本,发现其survivin基因外显子1的去甲基化频率为96%.结论 SYBR Green Ⅰ荧光PCR法具有快速、准确、敏感、实时、简单和敏感的特点,是检测survivin外显子1甲基化状态的一种可靠的新方法.